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臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師基礎(chǔ)綜合醫(yī)學(xué)微生物學(xué):(2)

時間:2010-05-11 16:45:00   來源:環(huán)球職業(yè)教育在線     [字體: ]
(八)細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則

  同學(xué)們應(yīng)重點(diǎn)掌握:1.細(xì)菌學(xué)診斷(1)標(biāo)本的采集原則(2)檢驗(yàn)程序

  2.血清學(xué)診斷:常用的血清學(xué)診斷方法

  3.人工主動免疫和人工被動免疫(1)適應(yīng)性(特異性免疫)的獲得方式(2)人工免疫的概念和常用的免疫制劑

  1.細(xì)菌學(xué)診斷

  (1)標(biāo)本的采集原則:嚴(yán)格無菌操作,在抗生素使用之前采集,采樣后盡快冷藏送檢及做好標(biāo)記。

  (2)病原菌的檢測程序:依次是標(biāo)本的采集,直接鏡檢,病原微生物分離培養(yǎng),抗原檢測、分子生物學(xué)技術(shù)檢測微生物特異性DNA或RNA、免疫學(xué)試驗(yàn)。

  2.血清學(xué)診斷

  (1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、放射免疫試驗(yàn)(RIA)及免疫熒光試驗(yàn)(IF)

  ELISA、RIA及IF均為用于檢測感染者血清中特異性抗體或抗原的方法,均為應(yīng)用標(biāo)記的抗原檢測血清中抗異性抗體,或應(yīng)用標(biāo)記的抗體檢測血清中特異性抗原。

  (2)蛋白印跡試驗(yàn)(Western blot,WB)

  蛋白印跡試驗(yàn)(WB)是在ELISA應(yīng)用原理基礎(chǔ)上發(fā)展的一項(xiàng)新技術(shù),用于檢測微生物的特異性蛋白抗原或患者相對應(yīng)的蛋白抗體的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。若用此試驗(yàn)檢測患者血清特異性抗體,可用已知微生物蛋白抗原捕捉患者血清中特異性抗體,再結(jié)合酶標(biāo)記抗人抗體并觀察結(jié)果。

  (3)中和試驗(yàn)(NT)

  中和試驗(yàn)(NT)為在檢測病原微生物(病毒、細(xì)菌等)的血清學(xué)試驗(yàn)過程中,先在被檢血清或其他液體標(biāo)本中加人已知的特異性抗體或抗原,使其發(fā)生中和反應(yīng)后,再檢測被檢血清中其特異性抗原或抗體。

  (4)試管凝集試驗(yàn)

  肥達(dá)氏試驗(yàn)是輔助診斷傷寒或副傷寒病常用的一種血清學(xué)試驗(yàn),即用已知傷寒沙門氏菌的菌體抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)及甲型或乙型副傷寒桿菌的鞭毛抗原(PA或PB抗原),測定人血清中相應(yīng)抗體效價。

  3.人工主動免疫和人工被動免疫

  (1)適應(yīng)性免疫(特異性免疫)的獲得方式:對某種感染性疾病的特異性免疫可由病后天然免疫和人工免疫獲得。人工免疫又分為人工主動免疫與人工被動免疫。

  (2)人工免疫的概念

 、偃斯ぶ鲃用庖撸菏怯萌斯そ臃N的方法給機(jī)體注射抗原性物質(zhì)(疫苗),使機(jī)體免疫系統(tǒng)因受抗原刺激而產(chǎn)生體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答的過程。此種免疫應(yīng)答出現(xiàn)較晚,維持時間較長,多用于疾病的預(yù)防。

 、谌斯け粍用庖撸簽閷⒑刑禺愋钥贵w的免疫血清或免疫細(xì)胞因子等制劑,直接注入機(jī)體,使之立即獲得免疫力。此種免疫持續(xù)時間短。

  (3)常用的免疫制劑

  1)人工主動免疫制劑:

  ①減毒活菌(疫)苗:如卡介苗、布氏桿菌減毒活菌苗等。

 、跍缁罹(疫)苗:如傷寒、百日咳及霍亂死疫苗等。

 、垲惗舅兀簽榧(xì)菌外毒素經(jīng)0.3%~0.4%甲醛液處理后,其毒性消失,但仍保留抗原性的生物制品。

 、軄唵挝灰呙纾喝缒X膜炎球菌和肺炎球菌的莢膜多糖疫苗。

  ⑤基因重組疫苗或稱基因工程疫苗:將微生物特異性抗原表達(dá)基因,與工程菌(如酵母菌)充足并表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)物,經(jīng)純化制成疫苗。最成功的為乙型肝炎重組疫苗。

 、 DNA疫苗:是將編碼病原表面某種具有保護(hù)性免疫作用的抗原基因插入酵母菌,使之表達(dá)目的基因。處于研究階段。